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如何正確使用無血清細胞凍存液?

發布時間: 2024-12-11  點擊次數: 786次
  無血清細胞凍存液是一種特殊的細胞保存液‌。
  
  1、‌成分明確‌:不含動物來源性蛋白和血清,有效減少細菌、病毒和支原體等污染風險‌。
  
  2、‌高安全性‌:由于不含有異源成分,因此具有更高的安全性,適用于體內研究‌。
  
  ‌3、細胞存活率高‌:含有DMSO、葡萄糖等細胞營養成分,有助于提高細胞的存活率和活力‌。
  
  ‌4、適用性廣‌:通用于各種動物細胞株,包括腫瘤細胞和常規細胞,也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞‌。
  

無血清細胞凍存液

 

  正確使用無血清細胞凍存液的步驟如下‌:
  
  1、‌細胞收集與離心‌:
  
  使用常規方法收集處于對數生長期的細胞。
  
  對于貼壁細胞,使用胰酶或EDTA消化,收集到試管中。
  
  將細胞懸浮液離心,通常條件為1000-2000rpm,4℃,持續3-5分鐘,保留細胞沉淀‌。
  
  2、‌加入凍存液與混合‌:
  
  向細胞沉淀中加入適量的無血清細胞凍存液。
  
  輕柔混合均勻,避免產生氣泡和剪切力,使細胞濃度達到適宜范圍‌。
  
  3、‌分裝與凍存‌:
  
  將混合均勻的細胞懸液分裝到冷凍保存管中。
  
  直接放入-80℃超低溫冰箱中進行冷凍保存,或先-80℃過夜再轉移至液氮罐中‌。
  
  4、‌注意事項‌:
  
  操作過程需在超凈工作臺內無菌進行。
  
  加入細胞后應盡快移至-80℃保存,減少室溫存放時間。
  
  控制好胰酶的消化時間,避免消化過度。
  
  重懸細胞時要輕柔且充分,避免細胞損傷和成團‌。
  
  遵循上述步驟和注意事項,可以確保無血清細胞凍存液的正確使用,提高細胞凍存效果。
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